【操作步驟】
（1）所有試劑在使用前需在常溫(25±3℃)平衡30 分鐘或30 分鐘以上時間。
（2）從鋁箔袋中取出抗原包被板，以1×洗滌液300μL/孔洗板1 次，棄去洗滌液并拍干。將血清稀釋板中稀釋好的待檢血清、陰性對照血清和陽性對照血清分別加入到ELISA 板中，50μL/孔，其中陽性對照血清和陰性對照血清各加2 孔（孔1、孔2）。
（3）每孔加入 50μL 已稀釋好的單克隆抗體。
（4）用封板膜封好反應板，振蕩混勻5 分鐘，37℃孵育30 分鐘。
（5）用已稀釋好的洗滌液洗板3 次，每次300μL。洗板后，棄掉孔內液體。在最后一次洗滌后，在紙上將板孔內殘留液體拍干。在進行下一步操作之前避免反應板干燥。
（6）在EP 管中將羊抗鼠酶標抗體與羊抗鼠酶標抗體稀釋液按1:99 充分混勻，如148.5μL 的羊抗鼠酶標抗體稀釋液中加入1.5μL 的羊抗鼠酶標抗體，稀釋后，每孔加入100μL。
（7）用封板膜封好反應板，37℃孵育30 分鐘。
（8）重復步驟（5）。
（9）將底物液A 和B 按1:1（V/V）混合后，立即加入到ELISA 反應板中，100μL/孔。
（10）用封板膜封好反應板，25±3℃避光靜置顯色15 分鐘。
（11）每孔加入50μL 終止液。
（12）反應終止后，15 分鐘內用酶標儀測定 OD450nm。
（13）判定和計算結果。
（更詳細資料請參照說明書）
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